1. В какой последовательности нужно вносить антитела?
1) сначала первичные антитела; +
2) антитела вносятся одновременно;
3) антитела вносятся последовательно с интервалом в 15 мин;
4) сначала вторичные антитела.
2. В каком случае не будет окрашивания в исследуемом и контрольном образцах?
1) использование не работающих антител; +
2) использование неподходящей системы визуализации;
3) недостаточное время инкубации с первичными или вторичными антителами;
4) некорректное хранение исследуемых образцов.
3. Варианты депарафинизации
1) промывка препаратов в ксилоле и спирте последовательно; +
2) обработка микроволнами, без использования химических растворителей;
3) промывка препаратов в ацетоне и растворе щелочи;
4) промывка препаратов в растворе соли и протеолитическом ферменте.
4. Время сушки монтированных срезов
1) 1-2 часа в термостате при температуре 60° или ночь при 37°; +
2) 30 мин в термостате при температуре 60° в горизонтальном положении;
3) 4 часа в термостате при температуре 60°;
4) ночью в термостате при температуре 60°.
5. Вследствие чего образуются «метиленовые сшивки» между белками в ткани?
1) при заливке ткани в парафин;
2) при холодовой ишемии;
3) в ходе обработки ткани изопропиловым спиртом;
4) в ходе обработки ткани формалином. +
6. Выберите причину появления фонового окрашивания
1) использование старых растворов; +
2) короткое время инкубации с антителами;
3) неправильное хранение антител;
4) несовместимость буфера для демаскировки или субстрат-хромогена.
7. Выберите причину слабого окрашивания ИГХ исследования
1) недостаточная концентрация антител в реакции; +
2) нарушена очередность этапов окрашивания;
3) не подавлена активность эндогенной пероксидазы;
4) несовместимость буфера для демаскировки или субстрат-хромогена.
8. Выберите причину, которая не приводит к отсутствию окрашивания в контрольном и исследуемом образце
1) высыхание среза во время окрашивания; +
2) нарушение очередности этапов окрашивания;
3) несовместимость буфера для демаскировки или субстрат-хромогена;
4) несовместимость первичных и вторичных антител.
9. Для чего используется гидрофобный карандаш?
1) для создания гидрофобного барьера вокруг среза; +
2) для доокрашивания клеток;
3) для маркирования стекол;
4) для фиксации биологических образцов.
10. Для чего нужна влажная камера при ручной постановке ИГХ исследования?
1) для поддержания постоянной влажности срезов при инкубации с антителами; +
2) для блокирования света при инкубации с антителами;
3) для ускорения реакции антител с антигенами.
11. Для чего нужна демаскировка антигена?
1) для восстановления эпитопов антигена, скрытых или модифицированных в результате фиксации; +
2) для инактивации нежелательных антигенов;
3) для увеличения специфичности антитела к антигену;
4) для уменьшения времени инкубации антител с антигеном.
12. Если в паспорте к антителу указан вариант демаскировки с буфером рН=6, какой буфер следует использовать?
1) цитратный буфер; +
2) промывочный буфер;
3) трис-ЭДТА буфер;
4) трис-буферный раствор с Твином.
13. За сколько по времени необходимо готовить раствор хромогена с субстратом?
1) непосредственно перед закапыванием; +
2) за 60 мин до начала исследования;
3) можно использовать недельной давности;
4) следует приобретать готовый.
14. Иммуногистохимический метод основан на взаимодействии
1) антиген-антитело; +
2) антигена с ферментативной меткой;
3) антитела с формалином;
4) вторичного антитела с хромогеном.
15. К чему может привести недостаточная промывка в промывочном буфере?
1) к фоновому окрашиванию; +
2) к недостаточному окрашиванию;
3) к перекрестным реакциям;
4) к слетанию срезов.
16. Какие адгезивы можно использовать для ИГХ?
1) полилизин; +
2) адгезив на основе желатина;
3) адгезивы на основе белков;
4) клей ПВА.
17. Каким дозатором нужно воспользоваться, если необходимо взять объем в 245 мл?
1) 100-1000 мкл; +
2) 0,5-10 мкл;
3) 1000-5000 мкл;
4) 20-200 мкл.
18. Какого варианта демаскировки антигена не существует?
1) воздействие ультразвуком; +
2) обработка в высокотемпературном буфере;
3) обработка ферментами;
4) протеолитическая обработка.
19. Какое из мероприятий не направлено на повышение качества ИГХ исследований?
1) изменение внешнего вида лабораторных помещений; +
2) контроль истечения срока годности каждого реагента;
3) регулярное обслуживание оборудования;
4) участие лаборатории в раундах по различным нозологиям и эпитопам в центрах контроля качества.
20. Какой хромоген чаще всего используется в иммуногистохимии?
1) 3,3'-диаминобензидин (DAB); +
2) алкалофосфатаза;
3) нитротетразолиум-блу тетразолиевой соли (NBT);
4) флуоресцеин-изотиоцианат (FITC).
21. На каком этапе может произойти контаминация посторонними фрагментами тканей?
1) на этапе депарафинизации; +
2) на этапе блокировки эндогенной пероксидазы;
3) на этапе визуализации;
4) на этапе внесения вторичных антител.
22. Оптимальная толщина срезов
1) 2-4 микрон; +
2) 4-5 микрон;
3) 5-6 микрон;
4) менее 0,5 микрон.
23. Отличие одно- и двухстадийной системы визуализации
1) в одностадийной используются только вторичные антитела с фермантативной меткой, а в двухстадийной добавляется линкерный раствор, обеспечивающий наилучшее выявление; +
2) одностадийная система использует только первичные антитела, в то время как двухстадийная система использует первичные и вторичные антитела;
3) одностадийная система основана на обнаружении антигена с помощью химических реакций, а двухстадийная система основана на обнаружении антигена с помощью флуоресценции;
4) одностадийная система предполагает только депарафинизацию, а двухстадийная система включает депарафинизацию и демаскировку антигена.
24. Отсутствие повторяющихся результатов в ИГХ исследовании не связано с
1) определением влажности в помещении лаборатории; +
2) использованием старых растворов;
3) нарушением продолжительности инкубации от постановки к постановке;
4) неправильным разведением антител.
25. Подкрашивание препаратов после завершения этапа ИГХ
1) гематоксилин и щелочной раствор; +
2) гематоксилин и эозин;
3) метиленовый синий и щелочной раствор;
4) не требуется.
26. Причина отсутствия окрашивания в исследуемом образце, при адекватном окрашивании в контрольном
1) использование плохо фиксированных или нефиксированных тканей; +
2) нарушена очередность этапов окрашивания;
3) несовместимость первичных и вторичных антител;
4) очень короткое время инкубации, либо низкая концентрация разведеных антител.
27. Причина слетания срезов со стекол
1) использование стекол с истекшим сроком годности; +
2) использование стекол с адгезивом на основе белков;
3) сушка стекол в вертикальном положении.
28. Продолжительность инкубации с первичными антителами зависит от
1) аффинности антител к антигену и концентрации антител в растворе; +
2) величины молекул антигена;
3) концентрации водорода в блокирующем растворе;
4) температуры хранения антител.
29. Чем блокировать эндогенную пероксидазу в ткани?
1) перекисью водорода; +
2) раствором ацетона и глицерола;
3) раствором щелочи;
4) фосфатно-солевым раствором (PBS) с альбумином.
30. Что следует использовать в качестве промывочного раствора?
1) буферные растворы на основе солей; +
2) дисстилированную воду;
3) дисстилированную воду с добавлением мыла;
4) раствор из изопропанола и дистиллированной воды.